准確檢測食品過敏原對加強食品安全管理至關重要OG视讯·(中国区)官方网站杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站。有效合理的預處理方法可以減少雜質的幹擾HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，提高過敏原的提取效率HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」，從而對檢測的靈敏度和准確性起到重要作用球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站。

2024年4月HOME_U8国际_U8共创美好未来，南昌大學陳紅兵教授團隊在Food Chemistry（IF=8.4）上发表题目为Lipid matrix-specific pretreatment method for enhancing the extractability and allergenicity maintenance of bovine milk allergens in ELISA detection的研究成果EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站MK(体育科技有限公司)体育·官方网站。该研究开发了一种针对脂质基质的预处理的方法K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口MK(体育科技有限公司)体育·官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。然后利用蛋白质组学分析确认了预处理对过敏原提取效果的影响HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站。该研究为食品过敏原检测提供了新策略杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，强调了匹配食品基质和过敏原类型的预处理方法的重要性威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口。

青蓮百奧爲該研究提供蛋白質譜檢測和分析服務HOME_U8国际_U8共创美好未来威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站。

XCSports网页版入口

1. 根據成分特性HOME_U8国际_U8共创美好未来，將食品基質進行分類MK(体育科技有限公司)体育·官方网站MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站，特別是針對脂質基質球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口OG视讯·(中国区)官方网站。

2. 結合超聲輔助正己烷脫脂和弱堿性提取系統HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」，爲牛乳過敏原開發特定的預處理方法MK(体育科技有限公司)体育·官方网站球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站。

3. 使用免疫學定量和光譜分析來評估過敏原的提取效率威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。

4. 通過LC-MS/MS分析、KU812細胞脫顆粒模型和西方印迹法來確認過敏原性是否得到保持K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口。

5. 對准確性（Bias）、重複性（RSDr）、穩定性（RSDR）進行評估HOME_U8国际_U8共创美好未来。

6. 將預處理方法應用于20種商業食品HOME_U8国际_U8共创美好未来K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，並與商業ELISA試劑盒比較杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口。

7. 使用LCSM（激光共聚焦掃描顯微鏡）和SEM（掃描電子顯微鏡）觀察預處理後脂肪和蛋白質的微觀結構變化HOME_U8国际_U8共创美好未来。

8. 測量提取物的粒徑和zeta電位OG视讯·(中国区)官方网站K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口，評估分散系統的穩定性HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口MK(体育科技有限公司)体育·官方网站。

研究結果

一、不同提取方法對牛乳變應原提取性能及蛋白質結構的影響

通过对比12种缓冲液MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站，研究发现弱碱性缓冲液（如PBS 8.2）更有效地提取牛乳过敏原HOME_U8国际_U8共创美好未来，且对蛋白质结构破坏较小球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口。SDS-PAGE分析表明醋酸和柠檬酸缓冲液处理的样品电泳带型有显著差异MK(体育科技有限公司)体育·官方网站HOME_U8国际_U8共创美好未来，不利于蛋白质提取和结构维持杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站。CD（圆二色光谱）和内源荧光光谱分析显示弱碱性缓冲液有助于保持蛋白质的二级和三级结构威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站。ELISA测定发现PBS 8.2和TBS 8.2在提取主要牛乳过敏原ALA、BLG和CSN方面最有效MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站。据此EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，建立了三种优化的过敏原预处理方法（ALA-Pre、BLG-Pre和CSN-Pre）MK(体育科技有限公司)体育·官方网站，显著提升了提取效率和检测准确性（图1）EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口OG视讯·(中国区)官方网站。

图1 用BLG-Pre和商品试剂盒前处理方法分析不同商品食品中BLG的回收率

二、不同前處理方法的過敏原提取液蛋白質組學分析

在蛋白質組學分析中威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口，不同預處理方法對牛乳過敏原提取物的蛋白質組成和相對含量有顯著影響OG视讯·(中国区)官方网站。ALA-Pre、BLG-Pre和CSN-Pre三種方法分別鑒定出500、470和481種蛋白質OG视讯·(中国区)官方网站MK(体育科技有限公司)体育·官方网站EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」，其中451種爲共同鑒定EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站MK(体育科技有限公司)体育·官方网站，而每種方法獨特鑒定的蛋白質分別爲7、1和4種HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。層次聚類分析發現138種顯著差異蛋白K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口，熱圖顯示BLG-Pre形成獨立聚類威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站OG视讯·(中国区)官方网站K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口，ALA-Pre和CSN-Pre形成亞簇MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站，與PCA分析一致OG视讯·(中国区)官方网站。

深入分析七種常見過敏原MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口，包括α-乳白蛋白、β-乳球蛋白等HOME_U8国际_U8共创美好未来威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站OG视讯·(中国区)官方网站，氣泡圖和補充表S3顯示三種預處理方法對特定過敏原提取具有特異性EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口。ALA-Pre、BLG-Pre和CSN-Pre組中豐度最高的過敏原分別爲κ-酪蛋白、κ-酪蛋白和αs2-酪蛋白杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，反映了酪蛋白的高含量和提取效率球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站HOME_U8国际_U8共创美好未来。特別是αs2-酪蛋白MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站，在CSN-Pre組中的豐度顯著高于其他組K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口MK(体育科技有限公司)体育·官方网站HOME_U8国际_U8共创美好未来。

图2 过敏原提取物的蛋白质组学分析MK(体育科技有限公司)体育·官方网站MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站。（A）蛋白质数量球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来HOME_U8国际_U8共创美好未来，（B）PCA分析威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站，（C）差异蛋白质聚类分析HOME_U8国际_U8共创美好未来，（D）常见牛奶过敏原的相对丰度

三、脂質基質食品過敏原提取物的過敏原性維持及方法驗證

通过KU812细胞脱颗粒模型评估了不同预处理方法对牛乳过敏原过敏原性的影响MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站MK(体育科技有限公司)体育·官方网站。实验结果显示HOME_U8国际_U8共创美好未来EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，与对照组相比OG视讯·(中国区)官方网站，所有预处理提取物均能显著诱导细胞释放β-己糖苷酶、组胺、IL-4和IL-6EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，表明过敏原性未受损害HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口MK(体育科技有限公司)体育·官方网站。此外威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站HOME_U8国际_U8共创美好未来杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，Western blotting分析证实了预处理后的过敏原保持了与对照组相似的IgG结合能力杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站，没有显著变化（图3）OG视讯·(中国区)官方网站威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站MK(体育科技有限公司)体育·官方网站。这些结果表明MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站，所建立的预处理方法有效保持了牛乳过敏原的免疫反应性和过敏原性杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站OG视讯·(中国区)官方网站MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站。

分析ELISA數據後杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，顯示預處理方法具有出色的准確性（偏差均值分別爲-8.47%、-7.94%和-8.90%）杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站MK(体育科技有限公司)体育·官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。ALA-Pre的重複性和穩定性（RSDr爲1.52%球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口OG视讯·(中国区)官方网站，RSDR爲5.65%）威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，BLG-Pre（RSDr爲0.77%K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口HOME_U8国际_U8共创美好未来杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，RSDR爲3.84%）OG视讯·(中国区)官方网站MK(体育科技有限公司)体育·官方网站威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站，以及CSN-Pre（RSDr爲2.54%MK(体育科技有限公司)体育·官方网站球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口OG视讯·(中国区)官方网站，RSDR爲6.81%）均在可接受範圍內K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口OG视讯·(中国区)官方网站，證明了這些預處理方法在提取牛乳過敏原時的准確性、重複性和穩定性MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站。

图3 使用相应的兔血清对过敏原进行蛋白质印迹分析MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口。(A) ALAMK(体育科技有限公司)体育·官方网站，(B) BLGHOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，(C) CSN

四、商品試劑盒在實際加工食品中的實際應用比較

在實際食品中的應用測試顯示OG视讯·(中国区)官方网站，與商業試劑盒相比威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，新開發的預處理方法在提取高脂食品中的牛乳過敏原方面更有效HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」，特別是在提取ALA和BLG時HOME_U8国际_U8共创美好未来，含量顯著高于商業試劑盒球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口。此外杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，通過LCSM和SEM成像K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口，新方法在脫脂和過敏原釋放方面表現更優MK(体育科技有限公司)体育·官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，誘導形成了更松散的微結構（圖4）HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。粒子尺寸和Zeta電位的測量結果進一步證實了新預處理方法在形成穩定分散系統方面的優勢MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站OG视讯·(中国区)官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，從而提高了過敏原的提取效率和穩定性（圖5）球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站。

图4 LCSM(A)观察脂质分布威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口MK(体育科技有限公司)体育·官方网站，扫描电子显微镜(B)观察超微结构MG不朽情缘·(中国大陆)官方网站。放大倍数为10k

图5 过敏原提取物的粒径(A)和zeta电位(B)

研究結論

本研究创新性地根据食品基质的组成特性分类威·尼·斯·澳·门·人游戏网站官方版(中国)官方网站EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」，并为脂质基质中的牛乳过敏原检测开发了匹配的预处理方法球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口。研究結果为食品过敏风险管理提供了科学依据K8·凯发【中国区】集团旗舰厅官网登录入口，并指出了根据食品基质和过敏原类型匹配相应预处理方法的必要性EON4-意昂4「强保障平台,更省心注册」。